E-Selectin/CD62E/SELE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400452

Visão geral

SELE codifica a E-selectina (CD62E), uma molécula de adesão endotelial induzível, rapidamente aumentada por citocinas inflamatórias como TNF-α e IL-1β. Ao ligar-se a ligantes sialilados e fucosilados (incluindo sialil-Lewis^x) em leucócitos, a E-selectina medeia a captura (“tethering”) e o rolamento (“rolling”) sobre o endotélio ativado, iniciando a cascata de adesão leucocitária e a migração transendotelial. A função de SELE cruza-se com a sinalização inflamatória dirigida por NF-κB e regula o recrutamento vascular de leucócitos que molda a inflamação tecidual e a vigilância imunitária. A expressão desregulada de E-selectina está associada a estados inflamatórios crónicos e patologia vascular, sendo frequentemente estudada em interações tumor–endotélio e em modelos de extravasamento relevantes para a metastização.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO E-Selectin/CD62E/SELE (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SELE em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SELE, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SELE na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína E-Selectin/CD62E/SELE.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SELE para a investigação da sinalização de E-Selectin/CD62E/SELE, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SELE críticos para a função E-Selectin/CD62E/SELE
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SELE para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo E-Selectin/CD62E/SELE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo E-Selectin/CD62E/SELE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SELE. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo E-Selectin/CD62E/SELE Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR E-Selectin/CD62E/SELE (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SELE para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SELE definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.