Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Double Nickase Plasmid (h): sc-401041-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Double-Nickase-Plasmid (h) und Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf DVL3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3: sc-271295
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401041-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401041-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DVL3 kodiert Dishevelled 3 (Dvl-3), ein zytoplasmatisches Gerüstprotein, das Wnt-Signale weiterleitet, indem es rezeptornahe Ereignisse downstream von Frizzled und LRP5/6 koordiniert. Dvl-3 ist sowohl an der kanonischen β‑Catenin/TCF‑Transkriptionsregulation als auch an nichtkanonischen Signalwegen der planaren Zellpolarität und des Wnt/Ca²⁺‑Signalwegs beteiligt und beeinflusst dadurch Zellpolarität, Zytoskelett-Remodelling, Migration und die Musterbildung während der Entwicklung. Über diese Signaloutputs trägt DVL3 zur Kontrolle von Proliferations- und Differenzierungsprogrammen bei und wird häufig in Kontexten untersucht, in denen Wnt-Signalwege umprogrammiert werden. Eine Fehlregulation der DVL3-abhängigen Signalübertragung wurde mit der Aktivierung onkogener Signalwege, veränderten Invasionsphänotypen sowie mit breiteren entwicklungs- und neurologischen Krankheitsmechanismen in Verbindung gebracht, die auf einer gestörten Kontrolle des Wnt-Signalwegs beruhen.
Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des DVL3-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von DVL3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die DVL3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit DVL3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.