Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) DUSP5: sc-401837-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DUSP5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DUSP5 Double Nickase (h) et le plasmide DUSP5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DUSP5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DUSP5 Antibody (H-9): sc-393801
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DUSP5 | sc-401837-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DUSP5 | sc-401837-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La phosphatase 5 à double spécificité (DUSP5) est une phosphatase nucléaire des MAPK qui déphosphoryle préférentiellement ERK1/2 activées, agissant comme régulateur par rétroaction de la cascade de signalisation RAF–MEK–ERK. En modulant des programmes transcriptionnels dépendants d’ERK, DUSP5 influence la progression du cycle cellulaire, la différenciation et l’expression de gènes sensibles au stress. Une expression ou une activité altérée de DUSP5 a été associée à une dérégulation de la signalisation mitogène et à un remodelage des voies observés dans de multiples contextes cancéreux ; elle est également étudiée dans des modèles de remodelage cardiovasculaire et de signalisation inflammatoire. En tant que régulateur négatif spécifique de voie, DUSP5 est fréquemment utilisée pour explorer les mécanismes qui contrôlent l’amplitude, la durée et la rétention nucléaire du signal ERK.
DUSP5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DUSP5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DUSP5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DUSP5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DUSP5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.