Plásmido Doble Nickase (m) DTX3L: sc-431621-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)DTX3L consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa DTX3L (m) y el plásmido de doble nickasa DTX3L (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Dtx3l. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) DTX3L | sc-431621-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) DTX3L | sc-431621-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DTX3L (ligasa de ubiquitina E3 deltex 3L) es una ligasa de ubiquitina E3 de tipo RING que se asocia con PARP9 para regular la señalización de ubiquitina vinculada a las respuestas al daño del ADN y a las vías estimuladas por interferón. Mediante la modulación de la ubiquitinación de proteínas, DTX3L influye en procesos asociados a la cromatina, programas transcripcionales y señalización de estrés celular que determinan las respuestas de la inmunidad innata. El Dtx3l de ratón se ha estudiado en contextos de señalización inflamatoria e interacciones huésped–patógeno, donde la regulación mediada por ubiquitina puede afectar la función de las células inmunitarias y las redes impulsadas por citocinas. La ubiquitinación desregulada y las vías dependientes de PARP conectadas con DTX3L también son relevantes para los mecanismos de estabilidad genómica y la biología del estrés oncogénico.
DTX3L El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Dtx3l en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Dtx3l. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Dtx3l. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Dtx3l alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.