dsg1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401442

概要

DSG1はデスモグレイン1（dsg1）をコードしており、カドヘリンファミリーに属するデスモソーム接着タンパク質として、重層上皮における細胞—細胞間結合を強化し、表皮バリアの完全性を支えます。DSG1はプラコグロビン、プラコフィリン、デスモプラキンと結合することで、細胞間接着を中間径フィラメントのネットワークへと連結し、分化、機械的耐性、組織形態形成を協調的に制御します。DSG1依存的なデスモソーム形成が乱れると、ケラチノサイトのシグナル伝達、接合部のリモデリング、ストレス応答が変化し得ます。遺伝性および後天性のDSG1機能不全は、皮膚の脆弱性や炎症性の表現型と関連しており、上皮の恒常性や疾患機序を研究する上で重要な標的となります。

dsg1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるDSG1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、DSG1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、DSG1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、dsg1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、dsg1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、DSG1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• dsg1の機能に不可欠なDSG1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、DSG1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• dsg1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびdsg1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、DSG1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  dsg1 HDRプラスミド（h）および dsg1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDSG1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDSG1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。