DRAK2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404787

概要

STK17B は、デスアソシエーテッド・プロテインキナーゼ（DAPK）ファミリーに属するセリン／スレオニンキナーゼである DRAK2 をコードしており、免疫細胞におけるシグナル伝達の閾値を調節します。DRAK2 は、T 細胞受容体（TCR）依存的な活性化の制御、Ca2+ シグナルのダイナミクス、および増殖・サイトカイン応答・生存を規定する下流の転写プログラムの調整に関与するとされています。これらの機能を通じて、アポトーシスや細胞ストレス応答の制御にも寄与し、免疫恒常性や炎症に影響する経路と統合的に作用します。STK17B の活性や発現の変化は、免疫調節異常や炎症性疾患の文脈と関連づけられており、白血球生物学の機序研究における有用な解析ノードとなっています。

DRAK2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSTK17B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、STK17B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、STK17Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、DRAK2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、DRAK2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、STK17B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• DRAK2の機能に不可欠なSTK17Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、STK17Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• DRAK2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびDRAK2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、STK17B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  DRAK2 HDRプラスミド（h）および DRAK2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSTK17Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSTK17B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。