Plásmido Doble Nickase (h) DPF1: sc-409539-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)DPF1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa DPF1 (h) y el plásmido de doble nickasa DPF1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DPF1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) DPF1 | sc-409539-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) DPF1 | sc-409539-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DPF1 (double PHD fingers 1; también conocido como BAF45B) codifica una subunidad asociada a la cromatina de los complejos de remodelación SWI/SNF (BAF) que interpreta marcas de histonas mediante sus dominios tipo dedo PHD para modular la accesibilidad de los nucleosomas. A través de la regulación de la actividad de potenciadores (enhancers) y promotores, DPF1 contribuye a programas transcripcionales vinculados al desarrollo neural, la especificación de linaje y la expresión génica en respuesta a estímulos. La alteración de la composición del complejo BAF y del remodelado de la cromatina se ha implicado ampliamente en la diferenciación desregulada y en estados transcripcionales oncogénicos, lo que convierte a DPF1 en un objetivo útil para estudiar el control epigenético del destino celular y la transcripción dependiente del contexto. En células humanas, los experimentos centrados en DPF1 permiten la investigación mecanística de vías acopladas al remodelado de la cromatina que configuran redes de expresión génica relevantes para el desarrollo y la reprogramación transcripcional asociada a enfermedades.
DPF1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DPF1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DPF1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DPF1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DPF1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.