DnaJC12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-412707

概要

DNAJC12は、細胞質および小胞体におけるタンパク質フォールディングとプロテオスタシスを制御するHSP70機構と協働する、Jドメイン共シャペロンであるDnaJC12をコードします。DnaJC12はHSP70のATPアーゼ活性を促進することで、クライアントタンパク質の成熟と安定化を支え、タンパク毒性ストレスに対する細胞応答の調整にも寄与します。このシャペロンネットワークは、ユビキチン–プロテアソーム系や小胞体関連分解（ERAD）経路とも連携し、タンパク質品質管理を維持します。DNAJC12の機能変化は、酵素の恒常性の破綻や神経代謝系の表現型と関連づけられており、ヒト細胞におけるストレス適応やタンパク質成熟経路を研究する上で重要です。

DnaJC12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるDNAJC12遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、DNAJC12内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、DNAJC12のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、DnaJC12タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、DnaJC12シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、DNAJC12欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• DnaJC12の機能に不可欠なDNAJC12エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、DNAJC12ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• DnaJC12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびDnaJC12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、DNAJC12遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  DnaJC12 HDRプラスミド（h）および DnaJC12 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDNAJC12ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDNAJC12標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。