DMRT1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-424507

개요

Dmrt1은 마우스 생식샘에서 성 결정과 분화 프로그램을 조절하는, DM DNA-결합 도메인을 포함한 보존된 전사인자 DMRT1을 암호화합니다. DMRT1은 Sertoli 세포 정체성을 촉진하고, 생식세포 발달을 조율하며, FOXL2에 의해 구동되는 네트워크를 길항하는 것을 포함해 난소 경로의 부적절한 활성화를 억제함으로써 출생 이후 고환의 유지에 필수적입니다. 또한 그 활성은 정세관 상피 내에서 감수분열과 정원세포(spermatogonia) 분화, 그리고 체세포–생식세포 간 신호전달을 전사 및 크로마틴 기반 조절과 통합해 조정합니다. DMRT1 관련 프로그램의 붕괴 또는 조절 이상은 성 발달 이상, 정자형성 장애, 생식샘 형성이상과 연관되어 있어, 생식생물학의 기전 연구에서 핵심적인 노드로 여겨집니다.

DMRT1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Dmrt1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Dmrt1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Dmrt1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DMRT1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DMRT1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Dmrt1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DMRT1 기능에 중요한 Dmrt1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Dmrt1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DMRT1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 DMRT1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Dmrt1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DMRT1 HDR 플라스미드 (m) 및 DMRT1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Dmrt1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Dmrt1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.