Plasmide Double Nickase (m) Dlx-3: sc-420014-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Dlx-3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Dlx-3 Double Nickase (m) et le plasmide Dlx-3 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Dlx3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Dlx-3 Antibody (B-5): sc-514094
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Dlx-3 | sc-420014-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Dlx-3 | sc-420014-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Dlx3 code le facteur de transcription à homéoboîte DLX-3, un régulateur nucléaire qui contrôle la spécification des lignages et les programmes de différenciation terminale au cours du développement embryonnaire. Chez la souris, DLX-3 contribue à des réseaux transcriptionnels gouvernant la morphogenèse cranio-faciale, la différenciation de l’épiderme et des follicules pileux, ainsi que le développement dentaire, en partie via la modulation de la signalisation épithélio-mésenchymateuse et des voies de kératinisation en aval. Une activité altérée de Dlx3 a été associée à des défauts de mise en place des patrons de développement et à des phénotypes de différenciation dérégulés, ce qui en fait un gène pertinent pour l’étude des malformations congénitales et de l’homéostasie tissulaire. En tant que facteur se liant à l’ADN, DLX-3 constitue également un nœud d’intérêt pour l’étude de la régulation génique dépendante des enhancers et des interactions avec d’autres protéines à homéodomaine au sein des circuits génétiques du développement.
Dlx-3 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Dlx3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Dlx3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Dlx3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Dlx3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.