DLK2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406327

概要

DLK2（delta like non-canonical Notch ligand 2）は、EGF様リピートを有する膜貫通タンパク質をコードしており、Notchシグナル伝達の非典型的なリガンド／モジュレーターとして機能します。ヒト細胞においてDLK2は、系譜決定、分化、組織パターニングを制御する細胞間コミュニケーションプログラムに影響し、前駆細胞状態や上皮―間葉系ダイナミクスを形作る経路とも交差します。DLK2の発現変化は複数の腫瘍環境や発生生物学モデルで報告されており、増殖制御、幹細胞様表現型、微小環境シグナル伝達への寄与を検討する意義が示唆されています。そのためDLK2は、非カノニカルNotch経路の制御機構と下流の転写応答を解析する上で有用です。

DLK2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるDLK2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、DLK2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、DLK2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、DLK2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、DLK2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、DLK2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• DLK2の機能に不可欠なDLK2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、DLK2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• DLK2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびDLK2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、DLK2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  DLK2 HDRプラスミド（h）および DLK2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDLK2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDLK2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。