Plasmide Double Nickase (h) Dermatopontin: sc-402924-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Dermatopontin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Dermatopontin Double Nickase (h) et le plasmide Dermatopontin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DPT. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Dermatopontin Antibody (F-4): sc-376863
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Dermatopontin | sc-402924-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Dermatopontin | sc-402924-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **DPT** code la dermatopontine, une protéine de la matrice extracellulaire enrichie dans les tissus conjonctifs, qui module la fibrillogenèse du collagène, l’assemblage matriciel et l’adhésion cellule–matrice. La dermatopontine influence la communication des voies de signalisation entre la matrice extracellulaire et les cellules, affectant des processus tels que la réparation des plaies, l’activité des fibroblastes et le remodelage tissulaire via des interactions avec des composants de la matrice et des voies de facteurs de croissance. Une expression altérée de **DPT** a été associée à un remodelage lié à la fibrose et à des modifications du microenvironnement tumoral, où l’organisation et la rigidité de la matrice extracellulaire peuvent influencer le comportement cellulaire. En tant que régulateur matriciel, **DPT** est fréquemment étudié dans les mécanismes gouvernant la biologie du stroma, l’angiogenèse et les réponses inflammatoires liées au renouvellement de la matrice extracellulaire.
Dermatopontin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DPT dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DPT. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DPT. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DPT.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.