DEDD CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423450

概要

Deddは、デスエフェクタードメイン（DED）を含むDNA結合タンパク質DEDDをコードしており、アポトーシスやカスパーゼシグナルに関連する転写プログラムを制御する因子です。DEDDは核小体およびクロマチンと結合すると報告されており、デスレセプター経路を下流の実行機構や、細胞周期に連動した遺伝子発現制御と結び付ける役割を担います。マウスモデルでは、Deddの機能攪乱が生存とプログラム細胞死のバランスに影響し、免疫恒常性や組織リモデリングの中核となる過程を左右し得ます。DEDDが関与するアポトーシスやストレス応答シグナルの異常は、細胞運命決定の変化が疾患表現型に寄与する炎症性疾患、神経変性、がん生物学の研究において重要なテーマです。

DEDD CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるDedd遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Dedd内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Deddのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、DEDDタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、DEDDシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Dedd欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• DEDDの機能に不可欠なDeddエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Deddゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• DEDD CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびDEDD CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Dedd遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  DEDD HDRプラスミド（m）および DEDD HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDeddホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDedd標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。