DDX21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-405770-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDX21 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DDX21, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDX21 Anticorpo (D-8): sc-376953
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDX21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-405770-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DDX21 é uma helicase de RNA do tipo DEAD-box, localizada no nucléolo, que coordena o processamento de rRNA, a biogênese de ribossomos e aspectos mais amplos do metabolismo de RNA por meio do remodelamento de complexos RNA–proteína. Ela participa de respostas ao estresse nucleolar e se conecta a programas transcricionais que acoplam sinais de crescimento à capacidade de síntese proteica, influenciando a progressão do ciclo celular e a proteostase. A DDX21 também tem sido implicada na sinalização da imunidade inata ao modular vias dependentes de RNA e a expressão de genes estimulados por interferon. A desregulação da função de DDX21 e alterações na biogênese ribossomal são frequentemente estudadas no contexto de transformação oncogênica, estresse genômico e biologia de infecções virais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DDX21 (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DDX21 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DDX21, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DDX21 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DDX21.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DDX21 para a investigação da sinalização de DDX21, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DDX21 críticos para a função DDX21
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DDX21 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DDX21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DDX21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DDX21. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DDX21 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DDX21 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DDX21 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DDX21 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.