DDX21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine): sc-437356

Visão geral

DDX21 codifica uma helicase de RNA nucleolar do tipo DEAD-box que coordena múltiplas etapas da biogénese dos ribossomas, incluindo a transcrição e o processamento do pré-rRNA, e sustenta a função nucleolar dependente da RNA polimerase I. Através da sua atividade de remodelação de RNA, a DDX21 ajuda a integrar a maturação do rRNA com programas mais amplos do metabolismo de RNA que influenciam a progressão do ciclo celular, a proteostase e as respostas ao stress celular. A perturbação da função de DDX21 está associada a alterações na integridade do nucléolo e na capacidade translacional, processos frequentemente estudados em contextos como sinalização proliferativa, estabilidade do genoma e fenótipos de adaptação ao stress. Em sistemas bovinos, a DDX21 é relevante para investigações mecanísticas do crescimento e desenvolvimento, interações hospedeiro–patógeno que afetam a produção de ribossomas e a regulação da expressão génica ligada ao nucléolo.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DDX21 (bovine) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene em linhas celulares bovine. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do , juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DDX21.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de para a investigação da sinalização de DDX21, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) críticos para a função DDX21
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo DDX21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine) e pelo DDX21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine2) têm como alvo locais distintos dentro do locus . Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo DDX21 Plasmídeo HDR (bovine) e o Plasmídeo HDR DDX21 (bovine2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.