Plasmide Double Nickase (h) DDR2: sc-400414-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DDR2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DDR2 Double Nickase (h) et le plasmide DDR2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DDR2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DDR2 Antibody (3B11E4): sc-81707
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DDR2 | sc-400414-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DDR2 | sc-400414-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le récepteur 2 à domaine discoïdine (DDR2) est une tyrosine kinase réceptrice activée par le collagène, qui relie la détection de la matrice extracellulaire à des voies de signalisation intracellulaires contrôlant l’adhérence, la migration et la prolifération cellulaires, ainsi que le remodelage de la matrice. Lorsqu’il se lie aux collagènes fibrillaires, DDR2 subit une autophosphorylation et active des voies telles que MAPK/ERK, PI3K–AKT, la signalisation de la famille SRC et des régulateurs du cytosquelette, influençant les transitions épithélio-mésenchymateuses et les interactions avec le stroma. L’activité de DDR2 est étroitement liée à l’homéostasie du tissu conjonctif et au renouvellement du collagène, et une signalisation DDR2 altérée a été associée au remodelage lié à la fibrose et à la dynamique du microenvironnement tumoral. En tant que cible humaine de DDR2, il est fréquemment étudié dans des modèles de signalisation induite par la matrice extracellulaire, de comportement invasif et de diaphonie entre tyrosines kinases réceptrices.
DDR2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DDR2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DDR2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DDR2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DDR2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.