DCAF16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-412364

概要

DCAF16は、CRL4 E3ユビキチンリガーゼ複合体における基質認識に関与する、DDB1およびCUL4結合因子をコードしており、ユビキチン依存的なプロテオスタシスや核内タンパク質のターンオーバー制御と関連しています。カリリン-RING型ユビキチン化経路の一部として、DCAF16は核内の転写プログラムやストレス応答性シグナル伝達に影響を及ぼす品質管理プロセスとの関与が示されています。ユビキチンリガーゼのアダプター機能が変化すると、細胞周期制御、DNA損傷応答、RNA代謝が攪乱され得るため、DCAF16はがん生物学やタンパク質恒常性の破綻を伴うその他の疾患における機構研究で重要なノードとなります。

DCAF16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるDCAF16遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、DCAF16内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、DCAF16のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、DCAF16タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、DCAF16シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、DCAF16欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• DCAF16の機能に不可欠なDCAF16エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、DCAF16ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• DCAF16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびDCAF16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、DCAF16遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  DCAF16 HDRプラスミド（h）および DCAF16 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDCAF16ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDCAF16標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。