DAZAP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407056

概要

DAZAP2（DAZ関連タンパク質2）は、受容体近傍で生じるシグナルを下流の転写応答や細胞骨格応答へとつなぐことに関与するとされる、アダプター様の細胞質タンパク質です。Wnt/β-カテニン経路やMAPK/ERK経路を含む主要なシグナル伝達カスケードの調節に関連づけられており、細胞増殖・分化や、状況依存的な転写プログラムに影響を及ぼします。さらにDAZAP2は、RNAおよびタンパク質の制御ネットワークに関わる因子とも相互作用し、転写後制御やシグナル依存的なタンパク質間相互作用における役割も示唆されています。DAZAP2の発現変化や経路への関与の変化は、複数のがん関連データセットで報告されており、ヒトモデル系における腫瘍性シグナルの再配線や細胞状態遷移を研究する上で重要な対象となります。

DAZAP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるDAZAP2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、DAZAP2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、DAZAP2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、DAZAP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、DAZAP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、DAZAP2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• DAZAP2の機能に不可欠なDAZAP2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、DAZAP2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• DAZAP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびDAZAP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、DAZAP2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  DAZAP2 HDRプラスミド（h）および DAZAP2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDAZAP2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDAZAP2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。