Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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D5DR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404047-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- D5DRO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase D5DR (h) e o Plasmídeo Double Nickase D5DR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DRD5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:D5DR Anticorpo (E-12): sc-376088
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
D5DR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404047-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
D5DR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404047-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O DRD5 codifica o receptor de dopamina D5 (D5DR), um receptor acoplado à proteína G que se associa predominantemente a Gs/olf para estimular a adenilil ciclase, elevar o cAMP e ativar a sinalização dependente de PKA. A sinalização do D5DR se intersecciona com a transmissão sináptica regulada por dopamina, a excitabilidade neuronal e a modulação de vias a jusante, incluindo programas transcricionais mediados por CREB. No cérebro e em tecidos periféricos, o DRD5 contribui para a regulação da função de circuitos neurais e da homeostase vascular/renal por meio da sinalização por cAMP e de interações (cross-talk) do receptor com outras vias de GPCRs e de canais iônicos. A desregulação da sinalização dopaminérgica envolvendo o DRD5 tem sido investigada no contexto de fenótipos neuropsiquiátricos e da regulação da pressão arterial, o que o torna um alvo útil para estudos mecanísticos da biologia das vias de dopamina.
D5DR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DRD5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DRD5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DRD5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DRD5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.