Cytokeratin 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402161-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cytokeratin 3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Cytokeratin 3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Cytokeratin 3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KRT3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cytokeratin 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cytokeratin 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KRT3 codifica a citoqueratina 3, uma proteína de filamento intermediário do tipo II que forma heteropolímeros obrigatórios com a queratina 12 para construir a rede do citoesqueleto das células epiteliais da córnea. Esse sistema de filamentos confere resistência mecânica, mantém a arquitetura epitelial e contribui para processos como diferenciação celular, migração e reparo de feridas por meio de uma regulação coordenada do citoesqueleto e das junções celulares. A alteração da expressão ou a desorganização estrutural de queratinas enriquecidas na córnea está associada a fenótipos de fragilidade epitelial e a patologia da superfície corneana, tornando o KRT3 um marcador útil e um componente funcional importante para o estudo da homeostase do epitélio ocular. Além disso, a remodelação da rede de queratinas se cruza com vias de resposta ao estresse e com sinalizações associadas ao citoesqueleto que influenciam a integridade da barreira e a regeneração tecidual.
Cytokeratin 3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KRT3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KRT3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KRT3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KRT3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.