Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
cytochrome c1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426027
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cytochrome c1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico cytochrome c1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:cytochrome c1 Anticorpo (A-5): sc-514435
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cytochrome c1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426027 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Cyc1 de camundongo codifica o citocromo c1, uma subunidade essencial do complexo III mitocondrial (ubiquinol–citocromo c redutase) que medeia a transferência de elétrons do ubiquinol para o citocromo c na membrana interna da mitocôndria. Por meio de seu papel no ciclo Q, o citocromo c1 contribui para a geração da força próton-motriz que impulsiona a síntese de ATP e sustenta a homeostase redox. A desorganização de componentes do complexo III pode prejudicar a fosforilação oxidativa, elevar as espécies reativas de oxigênio e desencadear efeitos secundários sobre a sinalização de apoptose e vias de controle de qualidade mitocondrial, como a mitofagia. Por isso, o Cyc1 é amplamente estudado em modelos de disfunção mitocondrial e estresse metabólico que se cruzam com mecanismos de doenças neuromusculares e neurodegenerativas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO cytochrome c1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cyc1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cyc1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cyc1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína cytochrome c1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cyc1 para a investigação da sinalização de cytochrome c1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cyc1 críticos para a função cytochrome c1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cyc1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo cytochrome c1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo cytochrome c1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cyc1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo cytochrome c1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR cytochrome c1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cyc1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cyc1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.