CYP2J6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419921

概要

Cyp2j6 は、シトクロムP450酵素である CYP2J6 をコードしており、内因性脂質および外来性化合物（ゼノバイオティクス）の酸化的代謝を担う、小胞体関連モノオキシゲナーゼです。CYP2J ファミリーの酵素はアラキドン酸エポキシゲナーゼ活性に寄与し、エポキシエイコサトリエン酸（EET）を産生することで、炎症シグナル伝達、血管トーヌス、細胞ストレス応答を調節します。酸化還元バランスや脂質メディエーター恒常性における役割を通じて、Cyp2j6 は肝臓および肝外の代謝、免疫調節、ならびに毒性物質誘発性の組織傷害に対する感受性に関連する経路へ影響し得ます。P450 依存的な脂質シグナルの変化は、心代謝機能障害や炎症性疾患の病態に関わる機序を検討するため、マウスモデルでしばしば活用されます。

CYP2J6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCyp2j6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cyp2j6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cyp2j6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CYP2J6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CYP2J6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cyp2j6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CYP2J6の機能に不可欠なCyp2j6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cyp2j6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CYP2J6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCYP2J6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cyp2j6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CYP2J6 HDRプラスミド（m）および CYP2J6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCyp2j6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCyp2j6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。