Plásmido Doble Nickase (h) CYP2F1: sc-404064-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CYP2F1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CYP2F1 (h) y el plásmido de doble nickasa CYP2F1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CYP2F1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CYP2F1 Anticuerpo (E-10): sc-377499
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CYP2F1 | sc-404064-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CYP2F1 | sc-404064-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP2F1 codifica una monooxigenasa del citocromo P450 que cataliza el metabolismo oxidativo de sustratos endógenos y xenobióticos, contribuyendo a reacciones celulares de desintoxicación y bioactivación. Como parte del sistema redox del P450, CYP2F1 acopla la transferencia de electrones desde NADPH a través de la reductasa del citocromo P450 para sostener reacciones de oxigenación que pueden influir en el estrés oxidativo, la formación de electrófilos y respuestas de señalización posteriores. La actividad de CYP2F1 es relevante para la biología de las vías respiratorias y del pulmón, donde la activación metabólica de ciertos compuestos inhalados puede afectar las respuestas de lesión epitelial y los procesos inflamatorios. La regulación alterada de CYP2F1 se ha investigado en el contexto de la variabilidad interindividual en el metabolismo de xenobióticos y la susceptibilidad al daño tisular inducido por sustancias químicas.
CYP2F1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CYP2F1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CYP2F1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CYP2F1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CYP2F1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.