Plásmido Doble Nickase (h) CYP2C9: sc-403593-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CYP2C9 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CYP2C9 (h) y el plásmido de doble nickasa CYP2C9 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CYP2C9. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CYP2C9 | sc-403593-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CYP2C9 | sc-403593-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP2C9 codifica una monooxigenasa del citocromo P450 hemo-tiolato que cataliza la biotransformación oxidativa de diversos xenobióticos y sustratos endógenos en el retículo endoplásmico. Como parte del metabolismo de Fase I, CYP2C9 contribuye a la transferencia de electrones dependiente de reacciones redox a través de la NADPH–citocromo P450 reductasa, modulando la exposición celular a intermediarios reactivos y las rutas de conjugación posteriores. Los polimorfismos genéticos y la expresión hepática alterada de CYP2C9 se asocian con la variabilidad interindividual en el aclaramiento de fármacos y la susceptibilidad a reacciones adversas a medicamentos, lo que lo convierte en un locus clave en farmacogenómica. La actividad desregulada de CYP2C9 también se estudia en el contexto de los mecanismos de lesión hepática y de la remodelación, a nivel de vías, de las redes de desintoxicación.
CYP2C9 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CYP2C9 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CYP2C9. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CYP2C9. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CYP2C9 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.