CYP2A13 Double Nickaseプラスミド (h): sc-403450-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CYP2A13 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CYP2A13ダブルニカースプラスミド（h）およびCYP2A13ダブルニカースプラスミド（h2）は、CYP2A13を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CYP2A13 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-403450-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP2A13 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-403450-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP2A13は、外来性化合物（キセノバイオティクス）および一部の内因性基質の酸化的代謝を触媒し、第I相生体内変換に寄与するヒトのシトクロムP450モノオキシゲナーゼをコードしています。CYP2A13の活性は、レドックスサイクリングや反応性中間体の生成と関連しており、細胞の酸化ストレス応答や、その下流にあるDNA損傷・修復過程に影響を及ぼし得ます。CYP2A13は呼吸器系組織で高発現しており、吸入された化合物や環境毒性物質の代謝的活性化とクリアランスに関与します。CYP2A13の発現量や機能の変動は、個人間における外来性化合物代謝の差異や、毒性物質に関連した肺の病態生理への感受性との関連で検討されてきました。
CYP2A13 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CYP2A13 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CYP2A13内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CYP2A13の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CYP2A13が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。