Plasmide Double Nickase (h) cyclin C: sc-402308-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) cyclin C correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide cyclin C Double Nickase (h) et le plasmide cyclin C Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CCNC. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) cyclin C | sc-402308-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) cyclin C | sc-402308-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCNC code la cycline C, une cycline régulatrice conservée qui s’associe à CDK8 ou CDK3 pour moduler la transcription par l’ARN polymérase II via le complexe Mediator et un contrôle des programmes transcriptionnels dépendant de la phosphorylation. La cycline C influence la progression du cycle cellulaire, l’expression de gènes répondant au stress et la dynamique mitochondriale, en intégrant des signaux qui remodèlent la chromatine et la production transcriptionnelle. La dérégulation de l’axe CDK8–cycline C a été associée à une altération des circuits transcriptionnels oncogéniques et à une prolifération aberrante dans divers contextes tumoraux, et les perturbations de CCNC sont également étudiées en lien avec les réponses au stress oxydant et des voies associées à l’apoptose. Ces fonctions font de CCNC une cible utile pour disséquer le contrôle transcriptionnel, la coordination des points de contrôle et le remodelage des réseaux d’expression génique dépendant des stimuli.
cyclin C Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CCNC dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CCNC. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CCNC. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CCNC.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.