CXCL16 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425819

Visão geral

Cxcl16 codifica a CXCL16, uma quimiocina transmembranar que pode sofrer clivagem proteolítica, gerando um ligante solúvel para o CXCR6 e coordenando o recrutamento quimiotático e a retenção de células T ativadas, células NKT e outros subconjuntos de leucócitos. A CXCL16 participa de redes de sinalização inflamatória que moldam a vigilância imune tecidual, a adesão de leucócitos e o diálogo mediado por citocinas nos microambientes vascular e parenquimatoso. Em modelos murinos, a sinalização CXCL16/CXCR6 tem sido associada a processos como inflamação aterosclerótica, tráfego de células imunes no fígado e no pulmão e interações entre tumor e sistema imune, tornando-a relevante para estudos de inflamação crônica e patologia imunomediada. Sua regulação se cruza com programas inflamatórios associados ao NF-κB e com vias de clivagem do ectodomínio que controlam o equilíbrio entre a atividade quimiocínica ligada à membrana e a solúvel.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CXCL16 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cxcl16 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cxcl16, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cxcl16 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CXCL16.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cxcl16 para a investigação da sinalização de CXCL16, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cxcl16 críticos para a função CXCL16
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cxcl16 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CXCL16 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CXCL16 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cxcl16. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CXCL16 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CXCL16 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cxcl16 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cxcl16 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.