CUZD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421190

概要

Cuzd1は、上皮細胞の生物学および分泌腺機能に関与するとされる、CUBドメインおよびzona pellucida様ドメインをもつタンパク質CUZD1をコードします。CUZD1には、タンパク質プロセシングや調節性分泌における役割が報告されています。マウス組織では、CUZD1の発現は腺上皮で高く、細胞分化、組織リモデリング、炎症性シグナルへの応答を制御する経路との関連が示されています。CUZD1の制御異常は、上皮の恒常性や増殖プログラムの変化と関連づけられており、バリア組織や外分泌臓器の生理機構を解明する研究において重要です。細胞状態を状況依存的に調節する因子として、CUZD1は分泌機能と増殖・ストレスシグナルを結びつける遺伝子ネットワークを解析するための足がかりとなります。

CUZD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCuzd1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cuzd1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cuzd1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CUZD1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CUZD1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cuzd1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CUZD1の機能に不可欠なCuzd1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cuzd1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CUZD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCUZD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cuzd1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CUZD1 HDRプラスミド（m）および CUZD1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCuzd1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCuzd1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。