Crossveinless-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406614

概要

BMPER は、分泌型の細胞外マトリックス糖タンパク質である Crossveinless-2 をコードしており、骨形成タンパク質（BMP）シグナル伝達の文脈依存的な調節因子として機能します。BMP リガンドに結合して BMP 受容体への利用可能性を調整することで、BMPER は内皮細胞の挙動、組織形態形成、細胞外マトリックスのリモデリングを制御する SMAD 依存性の転写プログラムに影響を与えます。BMPER の活性は、発生過程や血管の恒常性維持に関わる経路と交差しており、異常が生じると血管新生シグナルの破綻や結合組織の表現型に関連することが文献で報告されています。これらの特性により、BMPER は細胞モデルやオルガノイドモデルにおいて、BMP 勾配の形成、リガンドの隔離、ならびに経路のチューニングを研究するための有用な標的となります。

Crossveinless-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBMPER遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BMPER内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BMPERのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Crossveinless-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Crossveinless-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BMPER欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Crossveinless-2の機能に不可欠なBMPERエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BMPERゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Crossveinless-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCrossveinless-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BMPER遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Crossveinless-2 HDRプラスミド（h）および Crossveinless-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBMPERホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBMPER標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。