Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
CRISP-3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419036
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CRISP-3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CRISP-3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CRISP-3 Anticuerpo (D-6): sc-377505
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CRISP-3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419036 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Crisp3 codifica la proteína secretoria rica en cisteína 3 (CRISP-3), un miembro secretado de la superfamilia CAP implicado en la señalización extracelular y en la modulación de las interacciones entre células inmunitarias y epiteliales. CRISP-3 está enriquecida en tejidos exocrinos y mucosos, y se ha relacionado con la regulación de la actividad de proteasas, la defensa antimicrobiana y señales inflamatorias dentro del microambiente local. Gracias a su localización extracelular, CRISP-3 puede influir en la remodelación tisular y en procesos de inmunidad innata que se cruzan con las vías de respuesta a heridas y de función de barrera. Se ha informado de una expresión desregulada de CRISP-3 en contextos asociados a inflamación y en firmas transcriptómicas relacionadas con el cáncer, lo que convierte a Crisp3 en un nodo útil para estudiar la regulación del microambiente y la biología de factores secretados en modelos murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CRISP-3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Crisp3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Crisp3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Crisp3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CRISP-3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Crisp3 para la investigación de la señalización de CRISP-3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Crisp3 críticos para la función de CRISP-3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Crisp3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CRISP-3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CRISP-3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Crisp3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CRISP-3 (m) y el plásmido HDR CRISP-3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Crisp3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Crisp3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.