CRISP-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419036

概要

Crisp3は、システインに富む分泌タンパク質3（CRISP-3）をコードしており、細胞外シグナル伝達や免疫細胞・上皮細胞間相互作用の調節に関与するとされる、分泌型CAPスーパーファミリーの一員です。CRISP-3は外分泌組織や粘膜組織に多く存在し、局所微小環境におけるプロテアーゼ活性の制御、抗菌防御、炎症性シグナルの調節に関連付けられています。細胞外に局在することにより、CRISP-3は組織リモデリングや自然免疫過程に影響を及ぼし、創傷応答やバリア機能に関わる経路とも交差し得ます。CRISP-3の発現異常は、炎症関連の状況やがんに関連するトランスクリプトームシグネチャーで報告されており、そのためCrisp3は、マウスモデルにおいて微小環境の制御や分泌因子の生物学を研究するうえで有用なノードとなります。

CRISP-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCrisp3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Crisp3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Crisp3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CRISP-3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CRISP-3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Crisp3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CRISP-3の機能に不可欠なCrisp3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Crisp3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CRISP-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCRISP-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Crisp3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CRISP-3 HDRプラスミド（m）および CRISP-3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCrisp3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCrisp3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。