CRISP-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-417129

概要

CRISP3 は、システインに富む分泌性タンパク質 3（CRISP-3）をコードしている。CRISP-3 は CAP スーパーファミリーに属する分泌タンパク質で、外分泌組織や好中球顆粒などの免疫関連コンパートメントに多く存在する。CRISP-3 は、組織微小環境における自然免疫応答、上皮の分泌、プロテアーゼ制御性シグナル伝達に影響を与える細胞外のタンパク質間相互作用に関与するとされる。CRISP3 の発現変化は、炎症に関連する病態や複数のがんの文脈で報告されており、腫瘍生物学および免疫—上皮クロストークの研究において、バイオマーカー関連遺伝子として利用できることを支持している。細胞モデルでは、CRISP-3 の機能攪乱は、分泌プログラム、ストレス応答性経路、ならびに微小環境リモデリングを解析するために一般的に用いられる。

CRISP-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCRISP3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CRISP3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CRISP3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CRISP-3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CRISP-3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CRISP3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CRISP-3の機能に不可欠なCRISP3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CRISP3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CRISP-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCRISP-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CRISP3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CRISP-3 HDRプラスミド（h）および CRISP-3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCRISP3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCRISP3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。