CRISP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419035

概要

Crisp1 は、システインリッチ分泌タンパク質1（CRISP-1）をコードしており、雄性生殖管で高発現し、精巣上体内腔へ分泌される CAP（cysteine-rich secretory proteins／antigen 5／pathogenesis-related 1）スーパーファミリーの一員です。マウスでは、CRISP-1 は精巣上体での成熟過程で精子に結合し、精子の受精能獲得（キャパシテーション）の制御や、精子—透明帯結合、受精に関連する事象への関与など、配偶子間相互作用に寄与します。細胞レベルでは、CRISP-1 は分泌経路の生物学や細胞外タンパク質間相互作用と関連し、精子の膜特性やシグナル伝達特性を調節します。Crisp1 の発現異常（制御不全）は、雄性不妊表現型や生殖管機能に関する研究において重要であり、また粘膜および免疫関連の文脈における CAP ファミリータンパク質の役割を検討するモデルとしても用いられています。

CRISP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCrisp1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Crisp1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Crisp1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CRISP-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CRISP-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Crisp1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CRISP-1の機能に不可欠なCrisp1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Crisp1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CRISP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCRISP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Crisp1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CRISP-1 HDRプラスミド（m）および CRISP-1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCrisp1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCrisp1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。