CRELD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407369

概要

CRELD2（cysteine rich with EGF like domains 2）は、小胞体（ER）に局在し、ジスルフィド結合を含むタンパク質をコードしており、タンパク質の品質管理および分泌経路の恒常性維持に関与するとされています。CRELD2の発現はERストレス時にしばしば誘導され、アンフォールドタンパク質応答（UPR）シグナルと関連しており、その過程でプロテオスタシス、レドックスバランス、クライアントタンパク質の分泌に影響を与える可能性があります。これらの作用を通じて、CRELD2は細胞のストレス適応や炎症関連シグナルの文脈で研究されており、がんや代謝異常、線維化表現型など、複数の疾患関連状況で発現変動が報告されています。ER関連経路のモジュレーターとして、CRELD2はストレス応答性の分泌プログラムが細胞状態や生存をどのように規定するかを解明するための、解析可能な結節点（ノード）となります。

CRELD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCRELD2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CRELD2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CRELD2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CRELD2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CRELD2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CRELD2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CRELD2の機能に不可欠なCRELD2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CRELD2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CRELD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCRELD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CRELD2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CRELD2 HDRプラスミド（h）および CRELD2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCRELD2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCRELD2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。