Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Cortactin: sc-400761-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Cortactin consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Cortactin (h) y el plásmido de doble nickasa Cortactin (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CTTN. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Cortactin Anticuerpo (H-5): sc-55579
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Cortactin | sc-400761-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Cortactin | sc-400761-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTTN codifica cortactina, una proteína de andamiaje que se une a la actina y coordina la ramificación de actina dependiente de Arp2/3, además de estabilizar redes dinámicas de actina cortical. Al vincular el ensamblaje de filamentos con módulos de señalización, la cortactina favorece la formación de lamelipodios, la endocitosis y la maduración de invadopodios, integrando señales de quinasas de la familia Src y de las vías de Rho GTPasas para regular la adhesión y la motilidad. Se ha asociado la alteración de la dosis de CTTN o de su estado de fosforilación con una remodelación desregulada del citoesqueleto y fenotipos invasivos, lo que la hace relevante para estudios sobre migración de células tumorales y señalización asociada a metástasis. La cortactina también contribuye al tráfico de membrana y al recambio de receptores, conectando la dinámica de la actina con las respuestas de señalización de factores de crecimiento.
Cortactin El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CTTN en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CTTN. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CTTN. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CTTN alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.