Contactin 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403437

概要

CNTN1は、神経系に豊富に発現する、グリコシルホスファチジルイノシトール（GPI）アンカー型の免疫グロブリンスーパーファミリー細胞接着分子であるContactin 1をコードします。Contactin 1は、跳躍伝導を支えるニューロンとグリアの相互作用を調整することで、軸索ガイダンス、神経突起伸長、および傍絞輪接合部（paranodal junction）の形成に関与します。細胞間接着と膜マイクロドメインの組織化における役割を通じて、CNTN1は発生過程やシナプス再構築の際の細胞骨格ダイナミクスおよび神経回路の結合性に影響を及ぼします。CNTN1の発現や機能の異常は、神経発達性および神経変性の表現型と関連づけられており、腫瘍細胞の接着、遊走、浸潤性挙動に関する研究でも報告されています。

Contactin 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCNTN1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CNTN1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CNTN1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Contactin 1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Contactin 1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CNTN1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Contactin 1の機能に不可欠なCNTN1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CNTN1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Contactin 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびContactin 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CNTN1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Contactin 1 HDRプラスミド（h）および Contactin 1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCNTN1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCNTN1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。