Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) COMT: sc-401823-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)COMT consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa COMT (h) y el plásmido de doble nickasa COMT (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a COMT. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: COMT Anticuerpo (G-4): sc-137253
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) COMT | sc-401823-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) COMT | sc-401823-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La catecol-O-metiltransferasa (COMT) es una metiltransferasa citosólica y asociada a membrana que inactiva sustratos catecólicos mediante la transferencia de un grupo metilo desde la S-adenosil-L-metionina a catecolaminas y estrógenos catecólicos. Al regular el recambio de dopamina, norepinefrina y epinefrina, la COMT influye en la homeostasis de los neurotransmisores y en las respuestas celulares al estrés oxidativo y metabólico. La actividad de la COMT se integra en las vías de metabolismo de las monoaminas junto con la degradación dependiente de la MAO e impacta el equilibrio redox a través del ciclo de oxidación de las catecolas. La variación genética y de expresión de COMT se ha estudiado en el contexto de fenotipos neuropsiquiátricos, la sensibilidad al dolor y la biología relacionada con hormonas, lo que respalda su relevancia como diana mecanística en la investigación biomédica.
COMT El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus COMT en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de COMT. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de COMT. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con COMT alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.