CNTFRα CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402322

概要

CNTFR（繊毛神経栄養因子受容体α；CNTFRα）は、繊毛神経栄養因子（CNTF）に結合するグリコシルホスファチジルイノシトール（GPI）アンカー型の受容体サブユニットをコードしており、LIFRおよびIL6ST/GP130と複合体を形成してシグナル伝達を開始します。受容体が活性化されるとJAK/STAT、MAPK/ERK、PI3K/AKT経路が活性化し、神経細胞の生存や分化、グリア応答を制御するとともに、より広範なサイトカインシグナルのクロストークにも影響を及ぼし得ます。CNTFRαは神経発生および神経筋生物学に関与し、運動ニューロンの維持、末梢神経損傷後の応答、神経炎症性シグナル伝達といった文脈で頻繁に研究されています。CNTF–CNTFR軸の活性変化は、軸索の健全性、筋の神経支配、細胞運命制御など、神経学的表現型や疾患に関連する過程と関連づけられています。

CNTFRα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCNTFR遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CNTFR内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CNTFRのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CNTFRαタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CNTFRαシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CNTFR欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CNTFRαの機能に不可欠なCNTFRエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CNTFRゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CNTFRα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCNTFRα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CNTFR遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CNTFRα HDRプラスミド（h）および CNTFRα HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCNTFRホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCNTFR標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。