CNBP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419712
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CNBP El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CNBP, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CNBP Anticuerpo (H-7): sc-515387
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CNBP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419712 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Cnbp codifica la proteína celular de unión a ácidos nucleicos (CNBP), una proteína conservada de tipo dedo de zinc que se une a ADN y ARN monocatenarios para regular la transcripción y la traducción. CNBP participa en el metabolismo de los ácidos nucleicos y en el control de programas de expresión génica vinculados al crecimiento celular, las respuestas al estrés y la señalización relacionada con el sistema inmunitario. Se ha implicado en la regulación de elementos ricos en G y en la modulación de vías que influyen en la expresión de citocinas y en la diferenciación celular. La alteración de la función de CNBP se asocia con estados de expresión génica desregulados relevantes para fenotipos neuromusculares e inflamatorios, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos en modelos murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CNBP (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cnbp en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cnbp junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cnbp tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CNBP.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cnbp para la investigación de la señalización de CNBP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Cnbp críticos para la función de CNBP
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cnbp para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CNBP CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CNBP CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cnbp. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CNBP (m) y el plásmido HDR CNBP (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cnbp para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cnbp definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.