CLEC-2B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-425297

概要

Clec1bは、マウスのC型レクチン受容体であるCLEC-2Bをコードしており、リガンド依存的な細胞表面シグナル伝達に関与するとされるII型膜タンパク質です。C型レクチン様受容体ファミリーの一員として、CLEC-2Bは受容体介在性の活性化や下流のリン酸化カスケードを調節することで、免疫系および血管関連の細胞間コミュニケーションの制御に寄与します。血小板関連シグナル伝達ネットワークや炎症性微小環境との機能的な関連性から、Clec1bは止血、白血球—内皮相互作用、ならびに組織リモデリングの研究において重要です。レクチン受容体シグナル伝達の破綻は、血栓症に関連した炎症や免疫駆動性病態の文脈で、機序解明を目的としたマウスモデルを用いてしばしば検討されています。

CLEC-2B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるClec1b遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Clec1b内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Clec1bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CLEC-2Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CLEC-2Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Clec1b欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CLEC-2Bの機能に不可欠なClec1bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Clec1bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CLEC-2B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCLEC-2B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Clec1b遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CLEC-2B HDRプラスミド（m）および CLEC-2B HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはClec1bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のClec1b標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。