Plasmide Double Nickase (h) claudin-7: sc-403462-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) claudin-7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide claudin-7 Double Nickase (h) et le plasmide claudin-7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CLDN7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) claudin-7 | sc-403462-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) claudin-7 | sc-403462-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **CLDN7** code la claudine‑7, un composant transmembranaire à quatre passages des brins de jonctions serrées, qui contribue à réguler l’intégrité de la barrière épithéliale, la perméabilité paracellulaire et la polarité apico‑basale. La claudine‑7 interagit avec des protéines d’échafaudage jonctionnelles et coordonne l’organisation des domaines membranaires, ce qui influence l’adhérence cellule‑cellule, la différenciation et la morphogenèse épithéliale. Une expression ou une localisation altérée de **CLDN7** est associée à une perturbation de la fonction barrière et à des modifications des programmes de motilité, le reliant à des processus pertinents pour l’inflammation épithéliale et la progression tumorale. En tant que déterminant jonctionnel, **CLDN7** est fréquemment étudié dans des modèles d’homéostasie épithéliale, d’invasion et de remodelage dépendant du microenvironnement.
claudin-7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CLDN7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CLDN7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CLDN7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CLDN7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.