claudin-11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401859

概要

CLDN11は、タイトジャンクションを構成する4回膜貫通型タンパク質であるクローディン11をコードしており、細胞間（傍細胞）バリアを形成して、特化した上皮における選択的透過性を調節します。クローディン11は、有髄化グリアおよび精巣のセルトリ細胞の接着部におけるタイトジャンクションストランド構造の主要構成要素であり、細胞極性と組織の区画化を支えます。タイトジャンクションの組み立てやバリア維持の過程を通じて、CLDN11は上皮の完全性、イオン恒常性、ならびに細胞間接着に関わるシグナル伝達に影響を及ぼします。CLDN11の発現量や接合部の組織化の変化は、バリア機能不全や分化制御の破綻といった文脈で研究されており、神経系の髄鞘形成の生物学や生殖組織の恒常性維持との関連が示唆されています。

claudin-11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCLDN11遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CLDN11内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CLDN11のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、claudin-11タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、claudin-11シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CLDN11欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• claudin-11の機能に不可欠なCLDN11エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CLDN11ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• claudin-11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびclaudin-11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CLDN11遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  claudin-11 HDRプラスミド（h）および claudin-11 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCLDN11ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCLDN11標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。