CKR-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419708

概要

Ccr7はケモカイン受容体CKR-7（CCR7）をコードする遺伝子であり、CCL19およびCCL21に結合するGPCRです。これにより、T細胞、B細胞、樹状細胞の走化性および位置情報（ポジショナルキュー）が制御されます。CCR7シグナル伝達はGαi依存性経路を介してアクチン再構成、インテグリン活性化、ならびにMAPK/PI3Kシグナルに影響し、リンパ管内皮や二次リンパ組織を通じた白血球のトラフィッキングを支えます。マウスでは、Ccr7は免疫監視、リンパ組織の構築、炎症時における免疫細胞の制御された移動の中核を担います。CCR7依存的トラフィッキングの異常は、自己免疫、慢性炎症、腫瘍免疫微小環境のモデルで頻繁に研究されており、細胞ホーミングの変化が疾患進行の方向性を左右し得ます。

CKR-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCcr7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ccr7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ccr7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CKR-7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CKR-7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ccr7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CKR-7の機能に不可欠なCcr7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ccr7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CKR-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCKR-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ccr7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CKR-7 HDRプラスミド（m）および CKR-7 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCcr7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCcr7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。