CKR-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407896

概要

CCR10は、リガンドであるCCL27およびCCL28に結合し、白血球の走化性や組織特異的なホーミングを誘導する7回膜貫通型GPCRであるケモカイン受容体CKR-10をコードしている。CKR-10のシグナル伝達は三量体Gタンパク質を介して作動し、カルシウム動員、MAPKおよびPI3K依存性経路、インテグリン活性化、ならびに細胞骨格の再構築を制御することで、上皮バリアにおける細胞の移動や定位を総合的に形作る。この受容体は、皮膚および粘膜組織における免疫監視や炎症時の細胞移動プログラムに関与しており、CCR10活性の変化は局所の免疫細胞構成を変動させ得る。CCR10に関連するケモカインネットワークの破綻は、慢性炎症や腫瘍微小環境の生物学と関連して研究されており、遊走に焦点を当てた研究における機構的な結節点としての重要性が支持されている。

CKR-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCCR10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CCR10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CCR10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CKR-10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CKR-10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CCR10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CKR-10の機能に不可欠なCCR10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CCR10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CKR-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCKR-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CCR10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CKR-10 HDRプラスミド（h）および CKR-10 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCCR10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCCR10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。