CHCHD6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425817

Visão geral

Chchd6 codifica a CHCHD6, uma proteína com domínio hélice-enovelada–hélice–hélice-enovelada–hélice, enriquecida nas mitocôndrias, onde dá suporte à organização da membrana mitocondrial interna e à arquitetura das cristas. A CHCHD6 tem sido associada a processos relacionados ao sistema organizador de sítios de contato e cristas mitocondriais (MICOS), que coordenam a curvatura da membrana, a montagem da cadeia respiratória e a dinâmica mitocondrial. Por meio dessas funções, a CHCHD6 influencia a eficiência da fosforilação oxidativa, o equilíbrio de espécies reativas de oxigênio e a sinalização de estresse mitocondrial, o que pode impactar programas de sobrevivência e diferenciação celular. A desregulação da ultraestrutura mitocondrial e da homeostase bioenergética é relevante em modelos de neurodegeneração, disfunção cardiometabólica e outros distúrbios nos quais a integridade mitocondrial é um desfecho experimental fundamental.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CHCHD6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Chchd6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Chchd6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Chchd6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CHCHD6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Chchd6 para a investigação da sinalização de CHCHD6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Chchd6 críticos para a função CHCHD6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Chchd6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CHCHD6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CHCHD6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Chchd6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CHCHD6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CHCHD6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Chchd6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Chchd6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.