Plásmido Doble Nickase (h) CGRP2: sc-401165-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CGRP2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CGRP2 (h) y el plásmido de doble nickasa CGRP2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CALCB. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CGRP2 | sc-401165-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CGRP2 | sc-401165-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CALCB codifica el péptido relacionado con el gen de la calcitonina 2 (CGRP2), un neuropéptido generado por procesamiento proteolítico que señaliza principalmente a través del receptor similar al de calcitonina (CALCRL) en complejo con proteínas modificadoras de la actividad del receptor (RAMP). CGRP2 activa la señalización acoplada a Gs para aumentar el AMPc e iniciar programas transcripcionales aguas abajo dependientes de PKA/CREB, influyendo en el tono vasomotor, la inflamación neurogénica, la transmisión nociceptiva y la comunicación neuroinmunitaria. En las vías sensoriales periféricas y centrales, los péptidos de la familia CGRP coordinan respuestas vasculares e inmunitarias ante la actividad neuronal y modulan la excitabilidad sináptica. La desregulación de la señalización de CGRP se ha implicado en la biología de la migraña, en estados de dolor inflamatorio y en la homeostasis vascular, lo que convierte a CALCB en una diana relevante para estudios mecanísticos en modelos neurovasculares y neuroinflamatorios.
CGRP2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CALCB en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CALCB. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CALCB. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CALCB alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.