CEP70 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406527

概要

CEP70（centrosomal protein 70）は、細胞周期の進行に伴う中心体の成熟や微小管の編成に関与する、中心体関連因子です。中心体の構造や紡錘体機能を支えることで、CEP70は有糸分裂への効率的な移行、染色体分配、ならびに細胞極性の維持に寄与します。中心体および微小管制御ネットワークの攪乱は、ゲノム不安定性や増殖能の変化と関連しているため、CEP70は分裂の忠実性や細胞骨格制御を研究する上で重要な対象となります。がんに関連する状況では、中心体機能や紡錘体ダイナミクスの異常がしばしば観察されることから、CEP70は中心体恒常性と細胞増殖を結び付ける機構を解明するための有用な検討ノードと位置付けられます。

CEP70 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCEP70遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CEP70内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CEP70のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CEP70タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CEP70シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CEP70欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CEP70の機能に不可欠なCEP70エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CEP70ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CEP70 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCEP70 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CEP70遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CEP70 HDRプラスミド（h）および CEP70 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCEP70ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCEP70標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。