Plasmide Double Nickase (h) CENP-F: sc-402178-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CENP-F correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CENP-F Double Nickase (h) et le plasmide CENP-F Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CENPF. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CENP-F | sc-402178-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CENP-F | sc-402178-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CENPF code pour CENP-F, une grande protéine associée au kinétochore qui s’accumule en G2/M et coordonne la congrégation des chromosomes, la fidélité du point de contrôle du fuseau et l’attachement microtubules–kinétochore. CENP-F agit au sein des réseaux de progression mitotique, reliant la structure du centromère au transport médié par la dynéine/dynactine ainsi qu’à la reformation correcte de l’enveloppe nucléaire après la mitose. Une expression dérégulée de CENPF est fréquemment observée dans des états prolifératifs et a été associée, dans des études en biologie du cancer, à l’instabilité génomique et à une altération du contrôle du cycle cellulaire. En tant que régulateur de la division cellulaire, CENP-F est largement utilisée comme marqueur et nœud mécanistique pour étudier les défauts de mitose, l’aneuploïdie et les voies de ségrégation chromosomique dans les cellules humaines.
CENP-F Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CENPF dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CENPF. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CENPF. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CENPF.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.