Plasmide Double Nickase (h) Cdx1: sc-402522-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Cdx1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Cdx1 Double Nickase (h) et le plasmide Cdx1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CDX1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Cdx1 Antibody (D-4): sc-515146
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Cdx1 | sc-402522-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Cdx1 | sc-402522-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDX1 code le facteur de transcription à homéoboîte de type caudal Cdx1, un régulateur se liant à l’ADN de manière spécifique à la séquence, qui contribue à l’organisation antéro-postérieure et à la différenciation de l’épithélium intestinal. Cdx1 intègre des signaux développementaux, notamment les programmes dépendants de Wnt/β-caténine et de l’acide rétinoïque, afin de façonner des réseaux transcriptionnels spécifiques de lignée et l’identité régionale. Dans les tissus adultes, CDX1 contribue au maintien de l’homéostasie épithéliale et influence l’équilibre prolifération–différenciation via le contrôle transcriptionnel de gènes cibles en aval. Une expression dérégulée de CDX1 et une activité altérée de la famille CDX ont été associées à la métaplasie intestinale et à la biologie des tumeurs colorectales, ce qui en fait un locus utile pour des études mécanistiques de la transformation et de la différenciation épithéliales.
Cdx1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CDX1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CDX1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CDX1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CDX1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.