Plásmido Doble Nickase (h) CDKN3: sc-403243-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CDKN3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CDKN3 (h) y el plásmido de doble nickasa CDKN3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CDKN3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CDKN3 Anticuerpo (39): sc-135864
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CDKN3 | sc-403243-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CDKN3 | sc-403243-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDKN3 (inhibidor 3 de quinasas dependientes de ciclina) codifica una fosfatasa de doble especificidad que modula la progresión del ciclo celular al desfosforilar CDK1 y CDK2, influyendo así en la actividad de los complejos ciclina-CDK y en el control de los puntos de control en las transiciones G1/S y G2/M. A través de su impacto en la entrada en mitosis, el momento de la replicación del ADN y los programas de proliferación, CDKN3 se integra con las vías regulatorias centrales del ciclo celular, incluido el control transcripcional impulsado por RB/E2F. Se ha informado de una expresión desregulada de CDKN3 en múltiples contextos de cáncer y se estudia con frecuencia por su asociación con firmas proliferativas, inestabilidad genómica y una fidelidad alterada de los puntos de control. Como regulador humano del ciclo celular con actividad fosfatasa, CDKN3 también es relevante para estudios mecanísticos de la regulación mitótica, respuestas al estrés y vías que acoplan la fosforregulación con la proliferación.
CDKN3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CDKN3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CDKN3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CDKN3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CDKN3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.