CD8-β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400950
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD8-β O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD8-β, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD8-β Anticorpo (F-5): sc-25277
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD8-β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400950 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CD8B codifica o CD8-β, uma glicoproteína transmembranar do tipo I que forma um heterodímero com o CD8-α para constituir o correceptor CD8 em linfócitos T citotóxicos e em subpopulações de timócitos. Ao ligar-se ao MHC de classe I e associar-se à LCK, o CD8-β aumenta a intensidade da sinalização do TCR, apoiando a ativação específica por antígeno, a formação da sinapse imunológica e as vias a jusante que controlam a proliferação, a produção de citocinas e a diferenciação de efetores citolíticos. A expressão de CD8B contribui para a seleção tímica e para a manutenção da identidade de células T CD8+, influenciando a vigilância imunológica e as respostas à infeção. A desregulação da sinalização do correceptor CD8 e padrões alterados de expressão de CD8B são relevantes em estudos de autoimunidade, inflamação crónica, imunologia tumoral e fenótipos de exaustão de células T.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD8-β (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CD8B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CD8B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CD8B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD8-β.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CD8B para a investigação da sinalização de CD8-β, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CD8B críticos para a função CD8-β
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CD8B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD8-β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CD8-β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CD8B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD8-β Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CD8-β (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CD8B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CD8B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.